李靖， 刘慧玲， 郑胜英
(连云港市第二人民医院1.妇科，2.产科，江苏省连云港市222000)
宫颈癌是常见的女性恶性肿瘤，全球每年有超过50万例宫颈癌新增病例[1]。随着常规宫颈癌筛查的普及，其发病率已大大降低，这意味着宫颈癌癌前病变——宫颈上皮内瘤变(cervical intraepithelial neoplasia，CIN)检测和治疗的重要性提升[2]。CIN指子宫颈转化区细胞异常生长，根据所涉及的异常增生上皮数量及细胞异型性，CIN分为低级别鳞状上皮内瘤变(low grade squamous intraepithelial lesion，LSIL)和高级别鳞状上皮内瘤变(high grade squamous intraepithelial lesion，HSIL)[3]。CIN发展并最终导致侵袭性癌症的主要原因是高危人乳头瘤病毒(high risk human papillomavirus，HR-HPV)的持续感染[4]，但即使存在HPV感染也不一定会发生宫颈癌。因此，探讨其他影响CIN发生发展的机制具有重要意义。研究表明，HPV感染、免疫力、遗传学、性行为、吸烟和使用口服避孕药等因素影响了HPV感染转归及CIN的发生发展[5]。阴道微环境由阴道微生物生态和免疫系统构成，是宫颈生存和依赖的外部环境，其紊乱可能与CIN的发生发展有关。因此，本文对阴道微环境和HPV感染与CIN的相关性进行了研究，现报道如下。
1.1 一般资料
选取2017年8月—2021年3月就诊育龄妇女221例，均行宫颈脱落细胞学检查和阴道镜检查，根据病理学诊断结果分为LSIL组(CIN Ⅰ级)72例、HSIL组(CIN Ⅱ/Ⅲ级)45例和对照组(正常宫颈)104例。纳入标准：①>3年性生活的育龄妇女；
②样本采集前3天内无同房、阴道用药；
③近3个月内未进行阴道相关疾病治疗；
④宫颈和子宫完整；
⑤签署知情同意书。排除标准：①艾滋病、生殖器疱疹等其他生殖器感染性疾病；
②恶性肿瘤；
③免疫系统疾病，或有其他治疗影响免疫功能；
④重要脏器功能不全；
⑤精神疾病；
⑥妊娠或哺乳期妇女。
记录各研究对象年龄、家庭人均月收入、文化程度、主动或被动吸烟情况、药物避孕史、经期是否规律、经期是否同房、首次性生活年龄、初孕年龄、初产年龄、孕次、产次、宫颈癌家族史、细菌性阴道病(bacterial vaginosis，BV)、滴虫性阴道炎(trichomonas vaginitis，TV)、外阴阴道假丝酵母菌病(vulvovaginal candidiasis，VVC)等情况。
1.2 阴道分泌物的检测
经期结束后3～7天，使用无菌棉签于阴道后穹窿旋转取附着阴道分泌物，置于无菌试管中。采用阴道炎五联检测试剂盒(郑州安图生物工程股份有限公司)检测pH、过氧化氢、白细胞酯酶、唾液酸苷酶、脯氨酸氨基肽酶、乙酰氨基葡萄糖苷酶，依照说明书判读结果。
1.3 炎症细胞因子的检测
使用5 mL无菌生理盐水冲洗宫颈口，于阴道后穹窿吸取阴道灌洗液，置于无菌试管中，离心后收集上清液备用。采用酶联免疫吸附法使用相应试剂盒(美国赛默飞)检测阴道灌洗液样本中白细胞介素-2(interleukin，IL-2)、IL-4、干扰素-γ(interferon-γ，IFN-γ)水平。
1.4 HPV的检测
使用宫颈刷于宫颈口旋转轻扫，采集脱落宫颈细胞，置于细胞保存液中待测。使用HR-HPV核酸检测试剂盒(湖南圣湘生物科技有限公司)检测HPV，提取宫颈细胞样本中核酸，采用聚合酶链反应探针技术进行HPV分型检测，具体操作方法和结果判读参照试剂盒说明书。
1.5 统计学方法
2.1 CIN发生与临床特征之间的关系
对照组、LSIL组和HSIL组在药物避孕史、首次性生活年龄、初孕年龄、初产年龄、孕次、产次、HPV感染、阴道pH、BV、TV、VVC、阴道灌洗液IL-2、IL-4、IFN-γ水平方面差异有显著性(P<0.05；
表1)。
表1 CIN发生与临床特征之间的关系
2.2 LSIL或HSIL发生的单因素分析
以2.1中有差异的变量为自变量，以LSIL和HSIL为因变量进行Logistic回归分析显示，药物避孕史、首次性生活年龄、初孕年龄、初产年龄、HPV感染、阴道pH、BV、TV、VVC、IL-2、IL-4、IFN-γ均为影响LSIL和HSIL发生的因素(P<0.05；
表2和表3)。
表2 LSIL发生的单因素分析
表3 HSIL发生的单因素分析
2.3 LSIL或HSIL发生的多因素分析
Logistic回归多因素分析发现，HPV感染、BV、VVC、IL-2、IL-4、IFN-γ均为影响LSIL发生的独立危险因素(P<0.05；
表4)；
首次性生活年龄、HPV感染、阴道pH、BV、TV、VVC、IL-2、IL-4、IFN-γ均为影响HSIL发生的独立危险因素(P<0.05；
表5)。
表4 LSIL发生的多因素分析
表5 HSIL发生的多因素分析
HPV是一种广泛存在于自然界的DNA病毒，其中HR-HPV与HSIL和浸润性宫颈癌有关，约10%感染妇女中会发生致癌的HR-HPV持续感染，并与癌变有关[6]。因为感染细胞中HR-HPV编码的E6和E7癌蛋白可以与p53结合，招募泛素连接酶，降解p53[7]。E6和E7也可以结合和破坏pRb，进而破坏细胞周期检查点，导致基因组不稳定和感染细胞转化的高风险，同时影响局部免疫环境，增加HR-HPV逃避免疫攻击的可能性，导致宫颈癌进展[8]。但宫颈癌发生是一个多因素相互作用的过程，除HPV外，探讨其他有关危险因素对癌症预防和治疗具有重要意义。研究表明，阴道微环境与HPV的侵袭、持续感染及宫颈癌的发生发展密切相关[9]。因此，阴道微环境可能在CIN以及宫颈癌的疾病进程中发挥作用。
在正常情况下，阴道菌群由20多种微生物组成。生殖道感染导致阴道菌群失衡，从而抑制或减少乳杆菌，改变阴道pH，这可能导致机体对HR-HPV清除率下降。念珠菌、加德纳菌和滴虫是最常见的阴道感染病原菌。作为人类共生菌群的一部分，念珠菌属易引起全身和浅表感染；
阴道加德纳菌被认为在BV的发病机理中起着至关重要的作用，而BV与HPV阳性女性宫颈癌的严重程度相关；
滴虫作为一种性传播的传染源，被发现会引起局部炎症，并影响HR-HPV的清除并促进宫颈病变。有证据表明，阴道病原菌感染引起的炎症因子的持续激活可导致宫颈组织损伤，从而增加HPV16的易感性和致癌能力[10]。同时，宫颈病变的严重程度与子宫颈阴道菌群的丰富度和多样性呈正相关，与乳酸菌的数量呈负相关。本研究与这些报道相似，阴道pH、BV、TV、VVC为CIN发生发展的影响因素，提示临床中也应关注阴道微生物感染，尽早进行针对性干预和治疗，延缓CIN疾病进程。
研究表明，肿瘤微环境决定了肿瘤细胞的发展方向，并预测肿瘤细胞作为“种子”必须与周围环境“土壤”协同作用才能发生和发展[11]。宫颈病变是涉及多种因素调控的复杂生物学行为，其发展实际上是肿瘤细胞与人体环境相互作用的过程。免疫是肿瘤微环境中的另一个核心要素，在肿瘤发生中起关键作用。IL-2和IFN-γ是Th1细胞分泌的细胞因子，能激活细胞免疫，抑制肿瘤细胞增殖并诱导肿瘤细胞凋亡，具有抑制肿瘤形成的作用。谭超月等[12]报道IL-2和IFN-γ在宫颈癌形成过程中表达水平逐渐下降。IL-4是Th2分泌的细胞因子，参与体液免疫。在健康生理条件下，Th1细胞因子与Th2细胞因子处于相对平衡状态。在本研究中，随CIN进展，IL-2和IFN-γ水平下降，IL-4水平上升，并且三者是CIN发生发展的独立危险因素，表明阴道微环境免疫失衡，降低了清除HR-HPV和肿瘤细胞能力，进而可能促进宫颈癌发生。
综上所述，阴道微环境中微生物生态和免疫情况及HPV感染是CIN发生发展的独立危险因素，临床中应重点关注阴道微生物感染、炎症和HPV感染患者，及时给与针对性治疗，降低CIN发生可能性。
猜你喜欢细胞因子宫颈癌宫颈中老年女性的宫颈癌预防中老年保健(2021年12期)2021-08-24抗GD2抗体联合细胞因子在高危NB治疗中的研究进展现代临床医学(2021年4期)2021-07-31预防宫颈癌，筛查怎么做中国生殖健康(2020年7期)2021-01-18怀孕后宫颈管短怎么办中国生殖健康(2019年3期)2019-02-01这几种“宫颈糜烂”需要治疗中国生殖健康(2019年3期)2019-02-01HPV感染——“宫颈的感冒”中国生殖健康(2019年9期)2019-01-07Hepsin及HMGB-1在宫颈癌组织中的表达与侵袭性相关性分析河北医学(2016年5期)2016-12-01急性心肌梗死病人细胞因子表达及临床意义中西医结合心脑血管病杂志(2016年20期)2016-03-01细胞因子在慢性肾缺血与肾小管-间质纤维化过程中的作用医学研究杂志(2015年12期)2015-06-10扶正解毒汤联合调强放疗治疗宫颈癌50例中国中医药现代远程教育(2014年22期)2014-03-01